HPLC-基線漂移的各種問題及解決的方法
原因 解決方法
1、柱溫波動。(即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。)
1、控制好柱子和流動相的溫度,在檢測器之前使用熱交換器圖
2、流動相不均勻。(流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導致的漂移。)
2、使用HPLC級的溶劑,高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣,使用中使用氦氣。
3、流通池被污染或有氣體
3、用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用鹽酸)
4、檢測器出口阻塞。(高壓造成流通池窗口破裂,產生噪音基線)
4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。
5、流動相配比不當或流速變化
5、更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。
6、柱平衡慢,特別是流動相發生變化時
6、用中等強度的溶劑進行沖洗,更改流動相時,在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。
7、流動相污染、變質或由低品質溶劑配成
7、檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑
8、樣品中有強保留的物質(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現出一個逐步升高的基線。
8、使用保護柱,如有必要,在進樣之間或在分析過程中,定期用強溶劑沖洗柱子。
9、使用循環溶劑,但檢測器未調整。
9、重新設定基線。當檢測器動力學范圍發生變化時,使用新的流動相。
10、檢測器沒有設定在最大吸收波長處。
10、將波長調整至最大吸收波長處
基線噪音(規則的)
原因 解決方法
1、在流動相、檢測器或泵中有空氣
1、流動相脫氣。沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣。
2、漏液 。檢查管路接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要,更換泵密封。
3、流動相混合不完全 。用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑
4、溫度影響(柱溫過高,檢測器未加熱)
4、減少差異或加上熱交換器
5、在同一條線上有其他電子設備
5、斷開LC、檢測器和記錄儀,檢查干擾是否來自于外部,加以更正。
6、泵振動 。在系統中加入脈沖阻尼器
基線噪音(不規則的)
原因 解決方法
1、漏液 圖 1、見第三部分。檢查接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要,更換密封。檢查流通池是否漏液。
2、流動相污染、變質或由低質溶劑配成
2、檢查流動相的組成。
3、流動相各溶劑不相溶 3、選擇互溶的流動相
4、檢測器/記錄儀電子元件的問題
4、斷開檢測器和記錄儀的電源,檢查并更正。
5、系統內有氣泡 5、用強極性溶液清洗系統
6、檢測器內有氣泡 6、清洗檢測器,在檢測器后面安裝背景壓力調節器
7、流通池污染(即使是極少的污染物也會產生噪音。)
7、用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池
8、檢測器燈能量不足 8、更換燈
9、色譜柱填料流失或阻塞 9、更換色譜柱
10、流動相混合不均勻或混合器工作不正常
10、維修或更換混合器,在流動相不走梯度時,建議不使用泵的混合裝置
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