API 50 CH是一個標準化的微生物生化鑒定系統，含49種碳源代謝實驗。鑒定乳酸桿菌及其相關細菌采用API 50 CHL 培養基進行菌株培養；鑒定芽孢桿菌及相關細菌，腸桿菌科細菌和弧菌科細菌等類群則采用API 50 CHB 培養基。檢驗原理：
API 50 CH試條由50個微量孔組成，檢測微生物對不同碳水化合物及其衍生物底物的發酵。其原理為：試條培養過程中糖發酵產酸，pH改變而使培養基中指示劑顏色變化。試條上第一孔中不含任何活性成分，以此作為陰性對照。檢驗方法：
1. 試劑條的準備
每條試條分別由5個小試條組成，每個小試條上有10個小管。準備孵育盒（包括底盤和蓋子)，在盒子底盤一端的加長部分記錄菌株的編號， 加10 mL蒸餾水或去離子水于孵育盒底盤中，使其填滿所有的孔，以保持濕潤的氣體環境。2. 接種物的制備
在適當的培養基上接種細菌使其生長，確認菌株為純培養物。使用棉試子從固體培養基上收集菌株，在適當的培養基中制備接種物，菌懸液制備好后，應立即使用。3. 試劑條的接種
用無菌加樣器按要求將菌懸液加到試條上的50個管中，當菌懸液接種完成后，液面應避免出現新月形的凹陷或凸起。注：加礦物油可根據需要選擇，但對嚴格好氧菌不推薦使用。根據被檢細菌的生長需要，將試條放在適當的溫度進行培養，記錄結果。檢驗結果的解釋：
1. 讀取試劑條
根據細菌和所研究反應的類型，在達到了規定的培養時間后(如24小時，48 小時)，閱讀試劑條。2. 判讀
以陽性(+)，陰性 (-)，可疑(?)來解釋每一個試驗，將結果記錄在結果記錄單上。結果可產生生化反應譜，將其輸入到乳酸桿菌、芽孢桿菌及其相關細菌，或腸桿菌科細菌和弧菌科細菌的鑒定軟件中，即可得到鑒定結果。
