SOC培養基配方+ITPG
SOB培養基
配制每升培養基,在950ml去離子水中加入:
胰化蛋白胨 20g
酵母提取物 5g
NaCl 0.5 g
搖動容器使溶質完全溶解。加10ml 250mmol/L KCl溶液(將1.86g KCl用100ml去離子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH<!>調pH值至7.0。用去離子水定容至1L。在15 psi(1.05kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌20min。該溶液在使用前,加入5ml滅菌的2 mol/l MgCl2[2mol/L MgCl2溶液的配制方法如下:用90ml去離子水溶解19g MgCl2,用去離子水調整體積為100ml,在15psi(1.05kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌20min]。
SOC培養基
SOC培養基除含有20mmol/L葡萄糖外,其他成分與SOB培養基相同。SOB培養基經高壓滅菌后冷至60℃或60℃以下,加20ml除菌的1mol/L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制方法是:用90ml去離子水溶解18g葡萄糖,完全溶解后,用去離子水定容至100ml,用0.22um濾器過濾除菌)。
SOC 培養基(100ml)
2.0g Bacto? 胰蛋白胨
0.5g Bacto? 酵母抽提物
1ml 1M NaCl
0.25ml 1M KCl
1ml 2M Mg2+母液,過濾滅菌(按下法配制)1ml 2M 葡萄糖,過濾滅菌將Bacto? 胰蛋白胨、Bacto? 酵母抽提物、NaCl 及KCl 加到97ml 的去離子水中,攪拌使之溶解。高壓滅菌并冷卻到室溫。加入2M Mg2+母液和2M 葡萄糖至終濃度20mM。補加消毒蒸餾水至100ml。完全培養基用0.2μm 的濾膜過濾滅菌。最終pH 值為7.0。
2M Mg2+母液
20.33g MgCl2• 6H2O
24.65g MgSO4• 7H2O
加蒸餾水至100ml,過濾滅菌。
IPTG 母液(0.1M)
1.2g IPTG (目錄號#V3951)補加水至終體積50ml,過濾滅菌并貯存在4℃。
X-Gal (2ml)
100mg 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(產品目錄號:V3941)溶于2 ml 二甲基甲酰胺。用鋁箔封裹并貯存在-20℃。
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