脂肪酶活性測定方法
具體步驟如下:
取100 ml,三角瓶4個,每瓶加人5 mL磷酸緩沖液(pH= 7.5 , 0.02 5mol/1)和4m l,聚乙烯醇橄欖油乳化液,置于37 C水浴中保溫5 min,然后在兩個瓶中各加人1 MI.酶液。
從加人酶液開始精確計算時間,繼續保溫10 min,取出后立即加入95%乙醇5 ml,,以停止酶作用,再加酚酞指示劑3滴,用0.0 5m ol/I,的氫氧化鈉滴定至溶液呈粉紅色為止,另外兩個錐形瓶不加酶液,也繼續保溫15 min后,立即取出,各加人15 MI 95%乙醇作為對照。
取平均值計算酶的活性或相對活性..酶活力定義為在37 C pH=7.5條件下,每分鐘催化生成1 pmol脂肪酸所需的酶量為一個活力單位(U)。
還需要確定具體脂肪酶的性質,是酸性還是堿性,最適作用pH 以及溫度,通過實驗來確定,從而調整測定時磷酸緩沖液pH值,溫度等具體條件。
北京天優福康生物科技有限公司
官網:http://www.jyzjsd.com/
服務熱線:400-860-6160
聯系電話/微信:13718308763
QQ:2136615612 3317607072
E-mail:Tianyoubzwz@163.com